Kultivační nádrž s testováním citlivosti na antibiotika

  • Komplikace

Bakteriální kultura je dnes nejinformativnější studií, která vám umožňuje identifikovat původce choroby a určit citlivost patogenní mikroflóry na antibiotika. K biologickému setí jsou vhodné všechny biologické tekutiny lidského těla - moč, výkaly, krev, sperma, hlen z ústní dutiny nebo genitálií. Ale v drtivé většině případů tuto výzkumnou techniku ​​používají urologové a gynekologové. To znamená, že mluvíme o urogenitálních nátěrech.

Když je vydáno analytické přiřazení pro bakteriální kulturu?

Ošetřující lékař může dát pacientovi doporučení na urogenitální nátěr v případě podezření na bakteriální infekci. Dalším důvodem pro analýzu je rutinní vyšetření a prevence rozvoje bakteriálních onemocnění. Bakteriální kultura je nejinformativnější metodou výzkumu při identifikaci pohlavně přenosných patogenů. Biologický materiál pro výzkum se odebírá přímo z močové trubice, pochvy, děložního čípku nebo konečníku. Vše záleží na konkrétní situaci a stížnostech pacientů.

Studium mikroflóry je povinné při plánování těhotenství, v tomto případě je doporučení vydáno oběma partnerům. Těhotná žena pravidelně podstupuje kultivační test, protože patogenní mikroflóra může způsobit abnormální vývoj plodu a vyvolat předčasné ukončení těhotenství.

  • Když je vydáno analytické přiřazení pro bakteriální kulturu?
  • Příprava na výzkum
  • Kdo se podílí na dekódování analýzy bakteriální kultury?

Pokud se pacient obrátí na urologa se stížnostmi na nepohodlí během močení, bolesti v dolní části zad a dolní části břicha, aby se vyloučila infekce, je vydán odkaz na urogenitální nátěr.

Důvodem pro návštěvu gynekologa nebo urologa a doporučení pro bakteriální kulturu je vyrážka na genitáliích a v oblasti třísel, vředy, výskyt hnisavého výtoku nebo výtoku s výrazným zápachem.

Tato diagnostická metoda se také používá ke stanovení povahy mnoha dalších onemocnění, zejména onemocnění orgánů ORL. Například k určení příčiny hnisavého plaku v ústní dutině nebo hojného hlenu z nosu je také přiřazena tato analýza..

Příprava na výzkum

Bakteriální kultura se stanovením citlivosti na antibiotika vyžaduje dodržování určitých pravidel přípravy. Pouze v tomto případě bude možné říci, že získaná data odpovídají realitě a umožní stanovit správnou diagnózu..

Příprava závisí na tom, jaký druh biologického materiálu je pro výzkum potřebný. Například když mluvíme o žilní krvi, jediným doporučením je provést analýzu na lačný žaludek. A pokud je to možné, vzdejte se alkoholu a tučných jídel den před zákrokem.

Pokud potřebujete darovat moč, podmínky se mírně mění. Při absenci patologií je tekutina v močovém měchýři naprosto sterilní a její nasycení mikroflórou nastává již v době průchodu močovým traktem. Malý obsah patogenních mikroorganismů v kapalině je považován za normu, ale jejich překročení naznačuje vývoj onemocnění.

Proto je důležité správně shromáždit materiál pro analýzu. Za tímto účelem by pacienti měli dodržovat následující doporučení:

  • předběžná hygiena genitálií;
  • sběr „průměrné“ moči;
  • ke sběru analýzy se používají výhradně sterilní nádoby;
  • dodání moči do laboratoře nejpozději 2 hodiny po odběru.

Výkaly pro analýzu se shromažďují bezprostředně po defekaci ve sterilní nádobě.

Pokud se biologický materiál pro analýzu odebírá z ústní nebo nosní dutiny, pochvy, konečníku nebo močové trubice, odebírá se přímo ve stěnách zdravotnického zařízení..

Je zakázáno předem provádět hygienické postupy s použitím antiseptických látek, protože to zkreslí výsledky studie.

Těhotná žena dostane doporučení k bakteriálnímu setí dvakrát - v počátečním období (v procesu registrace) a v 36-37 týdnech. Tampon je odebrán z pochvy, děložního čípku a nosu. Hlavním cílem je kontrola mikroflóry sliznic. Pokud jsou zjištěny abnormality, je indikována urgentní léčba, zejména pokud jde o identifikaci E. coli v pozdním těhotenství - během přirozeného porodu se může dítě nakazit.

Mělo by být zřejmé, že nátěr na flóru a bakteriální kulturu jsou dvě různé metody výzkumu. V prvním případě je biologický materiál jednoduše studován za účelem identifikace bakterií. Ve druhém se získaný vzorek biomateriálu umístí do živného média. Po určitém časovém období je provedena studie "pěstovaných" mikroorganismů a jsou identifikováni původci onemocnění.

Na výsledky kultivace je třeba počkat 3 až 7 dní. Kromě toho pouze tímto způsobem je možné určit citlivost patogenní mikroflóry na antibiotika a zvolit nejúčinnější léčbu..

Kdo se podílí na dekódování analýzy bakteriální kultury?

  • Proč nemůžete držet dietu sami
  • 21 tipů, jak nekupovat zastaralý produkt
  • Jak udržet zeleninu a ovoce čerstvé: jednoduché triky
  • Jak porazit vaše chutě na cukr: 7 neočekávaných potravin
  • Vědci tvrdí, že mládež lze prodloužit

V laboratoři jsou po dokončení studia biologického materiálu vydávány hotové výsledky a již podle nich může ošetřující lékař stanovit diagnózu a vyvinout terapeutickou metodu.

Je zcela přirozené, že mnoho pacientů se pokouší nezávisle porovnat získané údaje se stanovenými normami. Nedostatek povědomí však může vést ke stresu. Například některé bakterie jsou podmíněně patogenní, to znamená, že poškozují tělo, pouze pokud jsou vytvořeny podmínky pro jejich aktivní reprodukci. Pokud jsou indikátory normální, není důvod k obavám. Existují výlučně patogenní bakterie, jejichž přítomnost v biologickém materiálu naznačuje onemocnění.

Vzhledem k tomu, že všechny bakterie jsou psány zkrácenými latinskými písmeny, je pro neinformovaného člověka velmi obtížné to pochopit. Není to však nutné. Nechte to udělat zkušeného lékaře, který dokáže nejen správně dešifrovat testy, ale také vypracovat plán dalších akcí, které přispějí k rychlému uzdravení..

  1. Asonov N.R. - Mikrobiologie: učebnice. - 4. vydání, Rev. a přidat. - M.: Kolos S, 2009.-- 352 s.

Další čerstvé a relevantní zdravotní informace na našem telegramovém kanálu. Přihlásit se k odběru: https://t.me/foodandhealthru

Specializace: specialista na infekční choroby, gastroenterolog, pulmonolog.

Celková zkušenost: 35 let.

Vzdělání: 1975-1982, 1MMI, san-gig, vyšší kvalifikace, lékař infekčních nemocí.

Vědecký titul: doktor nejvyšší kategorie, kandidát lékařských věd.

Výcvik:

  1. Infekční choroby.
  2. Parazitární nemoci.
  3. Nouzové situace.
  4. HIV.

Testování citlivosti na antibiotika: typy testů, získané výsledky a interpretace

Přehled analýzy

Test citlivosti na antibiotika je laboratorní test, který určuje typ patogenu, celkový objem patogenního prostředí. Než začnete s analýzou, musíte se připravit. Studie je obvykle naplánována ráno. Pacientům se nedoporučuje umýt, opláchnout nosní dírky, umýt si obličej. Antibiotika by neměla být užívána kvůli riziku falešných výsledků. Ošetřující lékař vám řekne, jak správně provést test.

Pro studium typu bakterií, stanovení farmakoterapie je indikován test citlivosti na antibiotika.

Hlavním cílem je určit typ bakterie, její rezistenci nebo citlivost na různé skupiny antibiotik.

Indikace a zkušební vzorky

Hlavními indikacemi pro jmenování analýzy jsou akutní zánětlivé procesy bakteriální povahy a příprava plánu pro další léčbu pacienta. Analýza se používá v chirurgii, urologii, nefrologii, onkologii a dalších oborech medicíny.

Sledovaný biologický materiál závisí na aktuální klinické anamnéze pacienta, lokalizaci zánětlivého ložiska. Při rozsáhlé sepse se doporučuje podrobné studium všech biologických materiálů. Vhodné pro výzkum:

  1. Krev. Podrobný biochemický hemotest pomáhá určit nejen typ patogenu, ale také celkový stav těla jako celku.
  2. Moč. Kultivace moči se provádí k objasnění genitálních infekcí, zánětu ledvin, orgánů urogenitálního traktu.
  3. Analýza stolice. Používá se u pacientů se zánětem trávicího traktu, komplikacemi akutních střevních infekcí, podezřením na parazitární infekce. Současně studujte fyzikální a chemické parametry výkalů.
  4. Krční výtěr u žen. Výzkumná metoda pomáhá identifikovat infekce genitálního traktu.
  5. Spermie, stěr uretry, sekrece prostaty. Testy bakteriální kultury se používají k objasnění infekcí různých lokalizací u mužů.
  6. Analýza sputa. Pomáhá diagnostikovat respirační onemocnění, plicní tuberkulózu, zápal plic. Současně se hodnotí množství nečistot - hnis, krev, hlen.

S chronickými patologiemi dýchacích cest a dýchacího systému je možné odebrat výtěr z nosních cest a hrtanu. Analýza je v pediatrii rozšířená kvůli snadnému odběru biologického materiálu.

Metody studia materiálů

Bakteriální kultura se provádí několika způsoby, včetně metody diskové difúze, E-testu a metody ředění. V každém případě se provádí specifický typ testu.

Metoda disku

Běžný a snadný způsob, jak určit typ bakteriální mikroflóry. Zkoušený materiál se umístí do Petriho misky po celém povrchu, umístí se malé kartonové disky zvlhčené určitým typem antibiotika. Poté, co je mísa pevně uzavřena a umístěna do termostatu při teplotě lidského těla na 12 hodin.

Bakteriální kultivace moči je předepsána pro podezření na infekce urogenitálního traktu a urogenitálního traktu

Pod vlivem difúzních procesů antibakteriálního léčiva se vytváří zóna potlačení patogenní mikroflóry. Na konci analýzy se změří průměr identifikované zóny potlačení.

E-test

Metoda bakteriálního setí je podobná disko-difúzní metodě, avšak místo kartonových disků je do misky vložena speciální pásová stupnice s různou intenzitou impregnace antibiotiky. Inokulace se inkubuje po dobu asi 12 hodin, poté se vyhodnotí účinnost každé impregnované zóny pásu. Volba antibiotika podle výsledku testu závisí na závažnosti inhibiční zóny v určité oblasti proužku. E-test je jednoduchá a cenově dostupná metoda testování, ale má vysoké náklady.

Chovné metody

Stanovení je založeno na sériovém dvojnásobném ředění antibiotika z maximální na minimální koncentraci. 1 ml biomateriálu se zředí 10krát v 10 zkumavkách živným médiem. Ve zkumavce, kde se zastaví růst patogenní mikroflóry, označují maximální limit počtu patogenů ve vzorku. Stejná metoda se používá k detekci citlivosti na antibiotika..

Minimální baktericidní koncentrace (MBC)

Minimální baktericidní koncentrace - nejnižší koncentrace antibakteriální látky, která ničí patogenní bakterie o 100%. Indikátor MBC se bere v úvahu také při léčbě pacientů, u nichž chybí účinnost dříve předepsané etiotropní terapie. Analýza flóry a MBC se používá zejména na pozadí osteomyelitidy, generalizované sepse nebo zánětu, bakteriální myokarditidy, endokarditidy.

Moderní laboratoře jsou vybaveny nezbytným vybavením pro stanovení typu a citlivosti bakterií. Získání výsledků trvá 1–2 dny, v závislosti na přepravě získaného materiálu a typu výzkumu.

Dekódování výsledků

Pro stanovení citlivosti antibiotika se hodnotí zóny inhibice růstu kolonií patogenních kmenů. Kategorie rezistence jsou nekonzistentní a jsou pravidelně přezkoumávány kvůli změnám antibakteriální citlivosti.

Analýza flóry se neustále uplatňuje v různých lékařských oborech.

Mutace patogenů je také způsobena nevybíravým používáním antibiotika bez dalšího výzkumu. Kliničtí lékaři rozlišují několik typů interpretací:

  • klinický;
  • mikrobiologické.

Hodnocení klinické metody je založeno na účinnosti konkrétního léku. Mikrobiologická interpretace je založena na distribuci koncentrace antibiotika a stupni potlačení patogenní aktivity při každé koncentraci. Díky mikrobiologické interpretaci je dávka léčiva volena tak, aby bylo dosaženo vysokých terapeutických výsledků.

Dekódování podle typu patogenu

Je-li povaha zánětlivého procesu nejasná, je rovněž nutná analýza citlivosti na antibiotika. Vzhledem k tomu, že po užití antibakteriálních léků mohou patogenní kmeny mutovat, měnit svůj stav, pak se mikroorganismy klasifikují na rezistentní, citlivé, podmíněně citlivé.

Udržitelného

Rezistentní nebo rezistentní bakterie se vyznačují dalším růstem a patogenní aktivitou, i když se užijí maximální dávky léčiva. V tomto případě je nutná dlouhodobá léčba, jmenování kombinovaných antibiotik s různými koncentracemi.

Podmíněně citlivé

Podmíněně citlivé nebo středně rezistentní bakterie vyvolávají různé terapeutické výsledky. Terapeutický účinek je dosažen zvýšením denní dávky léčiva, neustálou korekcí koncentrace antibiotika.

V některých případech jsou rezistentní a středně citlivé bakterie sloučeny do jedné skupiny rezistentních kmenů. Léčba je v tomto případě empirická. Předepisování minimální dávky s postupným zvyšováním. Mezi tyto patogeny patří chlamydie, ureaplasma, mykoplazma.

Citlivý

Citlivost bakterií na antibiotikum je charakterizována rychlým potlačením patogenní aktivity pod vlivem minimálních nebo standardních dávek léku specifických pro věk. K uzdravení stačí jeden léčebný kurz.

Na základě této klasifikace není jmenování antibiotik oprávněné pouze na základě stížností a klinického obrazu. Proto je indikováno pečení..

Získané výsledky výzkumu bakteriální kultury mají klinický význam až v okamžiku akutního období zánětlivého procesu. Pokud se tedy infekce po určité době opakuje, obraz se může výrazně změnit a dříve předepsané antibiotikum bude neúčinné. S každou exacerbací chronické infekce je indikován nový test..

Jednou z nejúčinnějších metod diagnostiky genitálních infekcí je bakteriologická kultura

Bakteriologická inokulace je jedním z typů laboratorního výzkumu založeného na analýze biologického materiálu jeho výsevem na speciální živná média. Podle výsledků bakteriální kultury se odhaluje přítomnost / nepřítomnost oportunních a patogenních mikroorganismů určitého typu za účelem dalšího studia jejich fyzikálních a chemických vlastností a stanovení režimu léčby diagnostikovaných infekčních onemocnění.

Hodnota této výzkumné metody spočívá v tom, že umožňuje nejen detekovat patogenní bakterie, ale také stanovit stupeň jejich citlivosti na antibakteriální léky. Jinými slovy, na základě analýzy je možné přesně vybrat sadu léků pro úspěšnou terapii..

Výhody metody

Hlavní výhody bakteriologické inokulace jsou následující:

  • Vysoká přesnost výzkumu. Na rozdíl od ELISA (enzymový imunosorbentní test), PCR (polymerázová řetězová reakce), je pravděpodobnost obdržení falešně negativních a falešně pozitivních výsledků prakticky nulová.
  • Jako biologický materiál je možné použít absolutně jakoukoli tekutinu uvolněnou z lidského těla.
  • Vývoj antibiotikogramu. To znamená stanovení stupně vlivu jednoho nebo jiného antibiotika na identifikované mikroby, což umožňuje provádět lékařské předpisy s nejvyšší možnou přesností.

Nevýhody metody

Nevýhody bakteriálního setí zahrnují následující faktory:

  • Složitost postupu a potřeba dodržet konkrétní požadavky na sběr materiálu.
  • Čekací doba na výsledek výzkumu.
  • Přítomnost speciální laboratoře a příslušná kvalifikace zdravotnického personálu zapojeného do analýzy.

Účel bakteriologické kultury

Bakteriologická metoda je v lékařské praxi poměrně běžná a používá se k diagnostice onemocnění v různých oblastech medicíny: chirurgie, onkologie, gastroenterologie, otolaryngologie atd. V gynekologii a urologii se tento typ laboratorní analýzy používá ke studiu mikroflóry za účelem diagnostiky následujících patogenů:

  • mykoplazmóza a ureaplasmóza;
  • trichomoniáza;
  • kandidóza (drozd);
  • chlamydie.

Na základě výsledků studie je možné nejen identifikovat přítomnost patogenních bakterií, ale také určit jejich kvantitativní složení. Což zase umožňuje pochopit fázi, ve které onemocnění postupuje, a koordinovat další léčbu.

Kromě nátěru z genitálií se pro bakteriální kulturu používá také řada dalších druhů biologického materiálu. Například:

  • Krev - pro kontrolu sterility, pro intravaskulární infekce, endokarditidu.
  • Sliznice z nosu, krku - k identifikaci virů a bakterií, které vyvolávají rýmu, zánět vedlejších nosních dutin, angíny a další nemoci ORL.
  • Výkaly - pro diagnostiku dysbiózy a jiných poruch gastrointestinálního traktu.
  • Žluč - v přítomnosti zánětlivých onemocnění jater, slinivky břišní, žlučníku.
  • Sputum - k určení infekcí dýchacích cest, zejména plicní tuberkulózy.
  • Sliznice oka - s rozvojem hnisavého zánětu očí a dalších očních patologií.
  • Kožní maz - k identifikaci stafylokoků, hub a dalších zástupců patogenní flóry akumulující se v epiteliální vrstvě kůže obličeje.

Mechanismus vedení

Postup laboratorního výzkumu lze podmíněně rozdělit do několika fází:

  • Odběr materiálu a jeho umístění na speciální živná média. Typ použitého média závisí na účelu bakteriální kultury (kultivace jednoho konkrétního patogenu nebo dekódování bakteriálních kultur za účelem dalšího vytvoření antibiotikogramu). V případě potřeby lze kapalná média následně nahradit pevnými povrchy, což umožňuje přesnější identifikaci bakteriálních kolonií.
  • Umístění kultivačního média do speciálního zařízení (termostatu), kde jsou vytvořeny vhodné podmínky pro růst a reprodukci patogenních patogenů. Na indikátorech vlhkosti vzduchu, teploty, osvětlení atd. Záleží..
  • Barvení materiálu různými činidly pro lepší kontrolu a další analýzu. Díky barvivům mění bakterie svou barvu a jsou zřetelnější na obecném pozadí živného média.
  • Hodnocení pěstovaných kolonií podle určitých ukazatelů: hustota, tvar, barva, chemické složení atd..

Důležité! Jednou z nejdůležitějších podmínek bakteriologické inokulace je dodržování absolutní sterility laboratorní místnosti a použitého nádobí a nástrojů. K přenosu materiálu do média se používají zařízení jako skleněná tyčinka, bakteriální smyčka, Pasteurova pipeta.

V tomto videu na příkladu bakteriologické analýzy moči vypráví o principu provádění bakteriální kultury.

Dekódování pekařského semene

Výsledek analýzy je hodnocen podle několika indikátorů, které zohledňují nejen kvalitativní faktor (potvrzení přítomnosti bakteriálních patogenů v prostředí), ale také kvantitativní - tj. Stupeň koncentrace patogenních mikroorganismů v testovaném materiálu. Pro výpočet počtu mikrobiálních buněk se používá koncept jednotky tvořící kolonie (CFU), pomocí které je možné určit úroveň nasycení bakterií ve studovaném vzorku.

Existují 4 stupně růstu patogenů:

  • Prvním je špatný růst bakterií na kapalném živném médiu a absence růstu na pevném médiu. Tento výsledek se nepovažuje za odchylku od normy..
  • Druhým je růst bakterií na pevném médiu až do 10 kolonií. Neindikuje přítomnost choroby, ale spíše kontaminaci laboratorních zásob pro výzkum.
  • Třetím je růst bakterií na pevném médiu v rozmezí 10–100 kolonií.
  • Za čtvrté - přes 100 kolonií.

V závěru věnovaném pacientovým rukám jsou výsledky bakteriální kultury uvedeny následovně:

  • je uveden název identifikovaného patogenu v latině (například Trichomonas vaginalis - Trichomonas);
  • je předepsána koncentrace mikroorganismu pěstovaného v živném médiu (norma je až 103 CFU / ml, odchylka je od 105 CFU / ml);
  • je uvedena povaha prostředí: flóra je podmíněně patogenní, patogenní.

Současně se stanovením koncentrace bakterií se provádí analýza jejich citlivosti na antibiotika. Přítomnost pozitivní reakce na jedno nebo jiné antibakteriální léčivo je označena symbolem "S", negativní - "R".

Pravidla pro vedení bakteriální kultury na mikroflóře u žen

Před provedením analýzy je nutné vzít v úvahu řadu povinných požadavků, pokud jde o dodržování pravidel osobní hygieny, jakož i mechanismus přímého sběru biologického materiálu. Jsou to následující:

  • den před zákrokem se vyhněte jakémukoli pohlavnímu styku (anální, orální, vaginální);
  • nepoužívejte sprchování, koupele, krémy na genitálie a jiné antiseptické procedury;
  • odmítnout používat vaginální čípky, tablety;
  • nátěr by měl být podán nejdříve 2 týdny po menstruaci;
  • vyloučit užívání antibiotik měsíc před analýzou;
  • před užitím materiálu po dobu 2 hodin nemočte.

Pro výzkum lze použít ploty z pochvy, močové trubice, děložního čípku, cervikálního kanálu. Před zahájením procedury se provede důkladné ošetření genitálií, v případě potřeby se vstup do pochvy uzavře vatovým tamponem. Při analýze moči se odebere její střední část, která se poté vloží do sterilní nádoby. Moč by měla být zpracována do 2 hodin po odběru a skladována při teplotě nepřesahující 20 ° C.

Pravidla pro vedení bakteriální kultury na mikroflóře u mužů

Jako materiál pro výzkum lze použít ejakulát (sperma), krev, moč a sekreci prostaty. Aby muži získali co nejpřesnější výsledek, měli by před provedením analýzy dodržovat následující požadavky:

  • zdržet se pohlavního styku 1–2 před testováním na bakteriální kulturu;
  • vyloučit užívání antibiotik 3-4 týdny před testem;
  • ne močit 4-5 hodin před odběrem vzorků;
  • důkladně umyjte genitálie a vyměňte spodní prádlo.

Jakékoli změny zdravotního stavu by měly být okamžitě hlášeny lékaři, aby se zabránilo nesprávným výsledkům testu..

Kultura během těhotenství

Jakákoli „spící“ bakteriální infekce v těle ženy může nepříznivě ovlivnit průběh těhotenství, vést k infekci plodu a v některých případech dokonce v počátečních stádiích vyvolat potrat. Abychom chránili sebe a nenarozené dítě před různými patologiemi, je nutné vědomě přistupovat k plánování koncepce a v případě potřeby provést vhodnou antibiotickou terapii..

Mezi indikacemi pro očkování bakterií se rozlišují tyto:

  • přítomnost zánětlivých onemocnění genitálií a urogenitálního systému;
  • identifikace příčin potratu s předběžnou diagnózou - neplodnost;
  • diagnostika zánětu prostaty (u mužů);
  • přípravné akce pro početí dítěte;
  • výběr správného léčebného režimu v přítomnosti genitourinárních infekcí;
  • častá změna sexuálních partnerů a zanedbávání mechanické antikoncepce (kondom);
  • mimoděložní těhotenství (vyskytující se nebo přítomné v minulosti).

Vážným nebezpečím pro zdraví ženy, zejména během těhotenství, je onemocnění ureaplasmózy. Protože je nejčastěji asymptomatická a následně způsobuje řadu závažných komplikací (endometritida, zánět dělohy atd.), Včasná diagnostika infekce pomáhá provést potřebnou terapii a snížit riziko infekce dítěte během těhotenství a porodu.

Podmínky připravenosti

Načasování připravenosti analýzy závisí na typu zkušebního materiálu a může se pohybovat od 3 do 14 dnů. Při odběru z urogenitálního traktu trvá trvání testu v průměru 7 dní. Plodiny pro mikroflóru (pro muže a ženy) trvají 5-8 dní. Předběžný výsledek lze získat nejdříve 3 dny po nátěru.

Vzhledem k relativnímu trvání a specifičnosti bakteriologické inokulace je dnes tento typ laboratorní studie jednou z nejpřesnějších a nejúčinnějších diagnostických metod, která umožňuje nejen určit typ patogenů, ale také naplánovat plán boje proti identifikované nemoci.

Bakteriologický (tankový) výsev: jak se provádí, metody, příprava, výsledky, účinnost

Je známo, že mikroorganismy mají navzdory svému „malému růstu“ také potravinové „závislosti“, teplotní optimum, obecně prostředí, které jim nejlépe vyhovuje, kde se cítí dobře a dobře, a proto se začínají intenzivně množit a růst.

Bakteriologická inokulace, nebo, jak se běžně říká, inokulační nádrž, se používá k získání velkého počtu mikrobů jednoho typu (čistá kultura) za účelem studia jejich fyzikálně-chemických a biologických vlastností, takže získané údaje lze poté použít k diagnostice infekčních onemocnění.

Bohužel ani dnes populární test s enzymem vázaným na imunosorbenty (ELISA), polymerázová řetězová reakce (PCR) a další metody, jejichž hlavní nevýhodou jsou falešně pozitivní nebo falešně negativní výsledky, nemohou vždy identifikovat patogen. Kromě toho nejsou schopni přijímat cílené antibakteriální léky. Podobný problém řeší výsevní nádrž, která se jmenováním často nijak nespěchá, s odkazem na skutečnost, že například uremikoplazma se pomalu kultivuje a náklady na analýzu jsou značné. Zdraví však nakonec stojí za to!

Podmínky výživy a dýchání

Mikrobiologové nyní vědí, že každý patogen potřebuje své vlastní „přirozené“ prostředí, které zohledňuje jeho pH, redoxní potenciály, viskozitu, vlhkost a osmotické vlastnosti. Média mohou být měkká a tvrdá, jednoduchá a složitá, všestranná a ne příliš, ale ve všech případech musí poskytovat výživu, dýchání, reprodukci a růst bakteriální buňky.

příklad růstu mikroorganismů po naočkování z nádrže do živného média

Některá média (thioglykolová, Sabouraud) jsou vhodná pro širokou škálu mikroorganismů a nazývají se univerzální. Jiné jsou určeny pouze pro určité druhy, například pneumokoky a Staphylococcus aureus, které produkují hemolysiny, rostou na krevním agaru, který slouží k izolaci zvláště „rozmarných“ a zároveň nebezpečných kmenů. Existuje tedy mnoho druhů prostředí, kde každé z nich pěstuje svou vlastní řadu mikroorganismů..

Účel kultivace mikroorganismů a jeho význam pro diagnostiku

Kromě vody, vzduchu, půd obsahujících různé mikroorganismy v určitých koncentracích, včetně těch, které přinášejí nemoci (patogenní), se mnoho oborů lékařské vědy zajímá o mikroby žijící na kůži a sliznicích lidského těla, které mohou být reprezentovány:

  • Trvalí obyvatelé, kteří nepředstavují žádné nebezpečí pro člověka, tj. Normální mikroflóru těla, bez níž prostě nemůžeme žít. Například vymizení bakterií, které žijí ve střevě a účastní se procesu trávení, vede k dysbióze, kterou není snadné léčit. Totéž se děje se zmizením vaginální mikroflóry. Okamžitě je osídleno oportunistickými mikroorganismy, například gardnerellou, které způsobují bakteriální vaginózu (gardnerelóza);
  • Podmíněně patogenní flóra, která je za určitých podmínek škodlivá pouze ve velkém množství (imunodeficience). Výše uvedená gardnerella je zástupcem tohoto typu mikroorganismů;
  • Přítomnost patogenních mikrobů, které nejsou přítomny ve zdravém těle. Jsou cizí lidskému tělu, kde náhodně spadnou do kontaktu s jinou (nemocnou) osobou a způsobí vývoj infekčního procesu, někdy docela závažného nebo dokonce smrtelného. Například setkání s původci syfilisu - ať už to bylo kdekoli, nejprve se to zachází, ale (nedej bože!) Uvolní choleru, mor, neštovice atd..

Naštěstí mnoho z nich bylo poraženo a v současné době jsou „zapečetěni“ ve speciálních laboratořích, ale lidstvo musí být kdykoli připraveno na invazi neviditelného nepřítele schopného zničit celé národy. V takových případech hraje bakteriologická inokulace možná hlavní roli při identifikaci mikroorganismu, tj. Při určování rodu, druhu, typu atd. (toxikologická situace), což je velmi důležité pro diagnostiku infekčních procesů, včetně pohlavně přenosných chorob.

Metody setí, jako jsou živná média, se tedy liší, ale mají stejný cíl: získat čistou kulturu bez nečistot ve formě mikrobů jiných tříd, které žijí všude: ve vodě, ve vzduchu, na površích, na lidech a uvnitř toho.

Když je přiřazena secí nádrž a jak rozumět odpovědím?

Název mikroorganismu a jeho množství

Pacienti si nepředepisují bakteriologickou analýzu, provádí ji lékař, pokud má podezření, že problémy pacienta s různými stížnostmi jsou spojeny s pronikáním patogenního patogenu do těla nebo se zvýšenou reprodukcí mikroorganismů, které neustále žijí s osobou, ale vykazují patogenní vlastnosti pouze v jisté podmínky. Poté, co jsem prošel analýzou a po chvíli obdržel odpověď do svých rukou, je člověk ztracen a někdy se bojí, když vidí nesrozumitelná slova a označení, proto, aby se tak nestalo, chci krátce vysvětlit tuto otázku:

  1. Prvním bodem závěru je zpravidla latinský název patogenu, například Escherichiacoli. Toto je Escherichia coli, je přirozeným obyvatelem střev a nepřijímá žádné škody v přijatelném množství;
  2. Další položkou je koncentrace mikroorganismu. E. coli - hojný růst (1 x 10 ^ 6 a více), norma je menší než 1 x 10 ^ 4;
  3. Dále - patogenita: flóra je podmíněně patogenní.

Při zkoumání biologického materiálu na přítomnost patogenních mikroorganismů může být reakce negativní nebo pozitivní („nádrž na špatný výsev“), protože lidské tělo je pro ně pouze dočasným útočištěm, nikoli přirozeným prostředím.

Někdy, v závislosti na tom, jaký materiál má být naočkován, můžete vidět počet mikroorganismů vyjádřený v jednotkách tvořících kolonie na ml (jedna živá buňka poskytne růst celé kolonie) - CFU / ml. Například kultivace moči pro bakteriologický výzkum rychlostí poskytuje až 103 CFU / ml všech detekovaných bakteriálních buněk, v pochybných případech (opakujte analýzu!) - 103 - 104 CFU / ml, se zánětlivým procesem infekčního původu - 105 a více CFU / ml. Někdy, hovorově, jsou poslední dvě možnosti jednoduše vyjádřeny: „Špatný výsev nádrže“.

Jak „najít spravedlnost“ pro patogenní mikroorganismus?

Současně s výsevem materiálu v takových situacích je mikroflóra zaseta pro citlivost na antibiotika, což dá lékaři jasnou odpověď - jaké antibakteriální léky a v jakých dávkách "vyděsí" "nezvaného hosta". Má také vlastní dešifrování, například:

  • Typ mikroorganismu, například stejná E. coli v množství 1 x 10 ^ 6;
  • Název antibiotika s označením (S) označuje citlivost patogenu na tento lék;
  • Typ antibiotik, která neovlivňují mikroorganismus, je označen symbolem (R).

Bakteriologická analýza má při stanovení citlivosti na antibiotika zvláštní význam, protože hlavním problémem v boji proti chlamydii, mykoplazmě, ureaplasmě atd. Je výběr účinné léčby, která nepoškodí tělo a nezasáhne kapsu pacienta..

Tabulka: Alternativní příklad výsledků kultivace v nádrži ukazujících účinná antibiotika

Správná příprava na bakteriologickou analýzu je klíčem ke spolehlivým výsledkům

Jakýkoli biologický materiál odebraný osobě (kůže, krev, sperma, sliznice ústní dutiny, dýchací a močové cesty, gastrointestinální trakt, orgány zraku, sluchu a čichu atd.) Mohou být podrobeny bakteriologické analýze. Nejčastěji je výsevní nádrž předepsána gynekology a urology, takže byste se měli trochu zdržet.

Správná příprava na bakteriologickou inokulaci bude klíčem ke správnému výsledku, protože jinak bude nutné analýzu provést znovu a počkat na stanovenou dobu. Jak darovat krev pro sterilitu z žíly je úkolem zdravotnických pracovníků. Zpravidla zde nic nezávisí na pacientovi, jednoduše provede loketní ohyb a sestra odebere vzorek do sterilní trubice v souladu se všemi pravidly aseptiky a antiseptik.

Další věc je moč nebo stěr z pohlavního ústrojí. Zde musí pacient poskytnout první fázi (plot) a dodržovat předepsaná pravidla. Je třeba poznamenat, že moč žen a mužů je poněkud odlišná, i když v močovém měchýři obou pohlaví je sterilní:

  • U žen může být při průchodu močovou trubicí zachycen malý počet nepatogenních koků, i když obecně zůstává sterilní;
  • U mužů je všechno poněkud jiné. Přední část močové trubice může dodávat močení:
    1. difteroidy;
    2. stafylokoky;
    3. některé nepatogenní gramnegativní bakterie, které budou později prokázány bakteriologickou analýzou.

Pokud jsou však v přijatelné koncentraci (až 10 3 CFU / ml), pak se není čeho bát, jedná se o variantu normy.

Aby se zabránilo přítomnosti dalších mikroorganismů a zajistila se co nejvíce sterilita odebraného materiálu, provede se před analýzou důkladná toaleta genitálií (vstup do pochvy u žen je uzavřen vatovým tamponem - ochrana proti vniknutí odnímatelných genitálií). Pro analýzu se odebere průměrná část moči (začátek močení do toalety, přibližně 10 ml střední dávky do sterilní nádoby, končící v toaletě). Pacienti potřebují vědět: moč odebranou k setí musí být zpracována nejpozději do dvou hodin, pokud je skladována při teplotě do 20 ° C, proto by měla být počítána doba přepravy.

Kromě toho se materiál pro kultivační nádrž, pokud je to nutné, odebírá z močové trubice a konečníku u mužů, z močové trubice, konečníku, pochvy, děložního čípku a cervikálního kanálu - u žen, ale to se děje v lékařském zařízení, kam musí pacient dorazit. V takových případech je zakázáno mytí, sprchování a používání antiseptik..

Další otázky týkající se pacientů

Mnoho pacientů se zajímá, kolik dní je analýza provedena. Na tuto otázku nelze jednoznačně odpovědět, vše závisí na tom, jaký materiál je studován a jaký patogen by měl být hledán. Někdy je odpověď připravena za 3 dny, někdy za týden nebo dokonce za 10 - 14 dní, protože některé vzorky vyžadují opětovné nasazení na jiné médium.

Lidé mířící k výsevní nádrži a otázka ceny analýzy neobcházejí. Přibližná cena v Moskvě je asi 800 - 1500 rublů. Samozřejmě může být vyšší a závisí na šíři spektra bakteriologického vyhledávání. Bezplatnou analýzu lze pravděpodobně absolvovat během těhotenství na prenatální klinice nebo na klinice ze zvláštních lékařských důvodů.

Pro těhotné ženy je výsevní nádrž povinná, podává se dvakrát (při registraci a po 36 týdnech), zatímco nátěr se odebírá nejen z genitálního traktu, ale také ze sliznic nosu a krku. Předmětem hledání v tomto případě bude kromě urogenitálních infekcí Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), který v poporodním období může způsobit spoustu neplechy (purulentní mastitida atd.). U těhotných žen je navíc povinná kultivace moči, škrábání vaginálního epitelu a nátěry z děložního čípku a cervikálního kanálu..

Mnoho žen, než se vydá na proceduru, se velmi bojí takových strašných slov a začne si myslet: „Je to nutné? Možná ne. “ Rychle vás ujistíme, že testy jsou naprosto bezbolestné. Roztěr z děložního čípku a cervikálního kanálu se odebere sterilním cytobrushem, aniž by ženě způsobil absolutně jakoukoli bolest, ale následně kultivační nádrž z w / ma c / c ochrání jak nastávající matku, tak plod před možnými komplikacemi. Předmětem hledání během těhotenství jsou patogeny chlamydií, močoviny a mykoplazmy, kvasinkové houby rodu Candida (obvykle Candida albicans), Trichomonas a další oportunní a patogenní mikroorganismy.

Video: ukázka videa na kultivační nádrži z cervikálního kanálu

Zvláštní případy, zvláště zajímavé pro ty, kteří podstupují testy

Jakmile se patogenní mikroorganismy dostanou do genitálního traktu, ve velmi krátké době se asimilují a zahájí svou škodlivou aktivitu. Například vždy patogenní gonokoky (Neisseria), které jsou původci poněkud nepříjemného onemocnění nazývaného kapavka a souvisí s pohlavně přenosnými chorobami, se cítí „jako doma“ doslova 3. den. Začnou se aktivně rozmnožovat a směle se pohybovat po genitálním traktu a dobývat nová území. Každý ví, že kapavka je nyní dobře léčena a téměř nikdo se jí nebojí. Nejprve je ale musíte najít. Za hlavní metodu hledání této infekce se považuje očkování nádrže, kultivace, identifikace pomocí Gramova barvení, mikroskopie.

Nalezeno v nátěru odebraném "na flóru" z genitálního traktu, ležící v párech "kávová zrna" (diplokoky), nenaznačují přítomnost pohlavní choroby. Taková mikroflóra vagíny se často objevuje u žen po menopauze a neznamená nic špatného. Roztěr vybraný za nesterilních podmínek na skleněném sklíčku a obarvený methylenovou modří nebo Romanovským (cytologie) nemůže mikroorganismus rozlišit. Může pouze navrhnout a odkázat pacienta na další výzkum (získání izolované kultury).

Je třeba poznamenat, že pokud škrábání ze sliznic močových cest, které se používá k výsevu na ureaplasmu, není tak vzácný výskyt, pak se lékaři sami vyhýbají kultivaci moči, protože je obtížnější s ní pracovat..

Chlamydiová infekce způsobuje potíže při diagnostice a způsobuje velké škody nejen během těhotenství. Chlamydie navíc způsobují mnoho nemocí, které jsou charakteristické nejen pro ženy, ale také pro mužskou populaci, takže jsou zasety, kultivovány, studovány, je stanovena citlivost na antibiotickou terapii, a proto s ní bojují..

Během těhotenství je obecně obtížné se obejít bez bakteriologické inokulace, protože je možné vynechat mnoho mikroorganismů maskovaných v cytologickém nátěru. Mezitím může být účinek některých patogenů STD na plod smrtelný. Kromě toho je mnohem obtížnější léčit těhotnou ženu a je prostě nepřijatelné předepisovat antibiotika "okem".

Metody setí

K izolaci čistých kultur patogenů v první fázi se uchylují k jejich výsevu do vhodných médií, které se provádí za zvláštních (sterilních!) Podmínek. V zásadě se přenos materiálu do životního prostředí provádí pomocí zařízení používaných v 19. století velkým Louisem Pasteurem:

  • Bakteriální smyčka;
  • Pasteurova pipeta;
  • Skleněná tyč.

Samozřejmě mnoho nástrojů prošlo během 2 století změnami, plastové sterilní a jednorázové byly nahrazeny, ale ty staré nezůstaly v minulosti a nadále slouží mikrobiologické vědě dodnes.

První fáze získávání kolonií vyžaduje dodržování určitých pravidel:

  1. Výsev se provádí přes lihovou lampu v krabici, předem ošetřené dezinfekčními prostředky a křemenem, nebo ve skříni s laminárním tokem, která zajišťuje sterilitu v pracovním prostoru;
  2. Oděvy, rukavice a prostředí zdravotníka musí být rovněž sterilní, protože zadní strana interferuje s izolací izolovaných kmenů;
  3. V boxu musíte pracovat rychle, ale opatrně, nemůžete mluvit a vyrušovat se, zatímco musíte pamatovat na osobní bezpečnost, protože materiál může být nakažlivý.

Izolace kmenů a studium čistých kultur

Izolace kmenů není vždy stejná, protože některá biologická prostředí v lidském těle vyžadují individuální přístup, například krevní kultura (krev), nejprve v kapalném médiu (poměr 1: 10), je mírně „vypěstována“, protože krev (neředěná) může zabíjet mikroorganismy a potom, po dni nebo více, se subkultivují do Petriho misek.

Výsev moči, výplachů žaludku a dalších tekutých materiálů má také své vlastní vlastnosti, kde k získání čisté kultury musí být tekutina nejprve odstředěna (podmínky jsou aseptické!), A teprve potom sejte, a ne samotná kapalina, ale její sediment.

Kultivace a kultivace kolonií se provádí na Petriho miskách nebo se nejprve umístí do kapalného média, nalije se do sterilních lahviček a poté se izolované kolonie znovu zasejí, ale již na šikmém agaru a materiál se umístí na jeden den do termostatu. Po ujištění se o čistotě získané kultury se kmeny přenesou na skleněné podložní sklíčko, vyrobí se nátěr a obarví se podle Grama (nejčastěji), Ziehl-Nielsena atd. A pro diferenciaci se morfologie mikrobu studuje pod mikroskopem:

  • Velikost a tvar bakteriální buňky;
  • Přítomnost kapslí, bičíků, spor;
  • Tinctoriální vlastnosti (poměr mikroorganismu k barvení) *.

* Čtenář pravděpodobně slyšel o takovém patogenu jako treponema pallidum? Jedná se o původce syfilisu, a proto se jeho název (bledý) ukázal, že barvy dobře nevnímá a při barvení podle Romanovského zůstává mírně růžový. Mikroorganismy, které nevnímají anilinová barviva, se nazývají gramnegativní a ty, které nevnímají, se nazývají grampozitivní. Další barviva (fuchsin, safranin) dodávají gram-negativním bakteriím během Gramova barvení růžovou nebo červenou barvu.

Očkovací nádrž lze nazvat starodávnou analýzou, ale její popularita kvůli tomu vůbec neklesá, ačkoli moderní bakteriologie má schopnost izolovat nejen kmeny, ale také jednotlivou buňku z ní, která se nazývá klon. K získání klonu je však zapotřebí speciální zařízení - mikromanipulátor, který v běžných laboratořích chybí, protože se používá hlavně pro výzkumné účely (genetický výzkum).

Tanková kultura z cervikálního kanálu pro flóru a citlivost na antibiotika

Když přijdeme ke gynekologovi, se stížnostmi nebo na profylaxi, vždy se nás žádá, abychom si lehli k vyšetření na židli, aby lékař mohl provést roztěry k analýze. Takzvaný stěr z flóry se bere absolutně vždy. Výsledek, pokud je laboratoř poblíž, může být do 10-15 minut. Nějak jsem se dostal k lékaři za poplatek a během mého pobytu v jeho kanceláři také analyzovali můj nátěr. Nátěr na flóru ukazuje počet leukocytů, dlaždicového epitelu, hlenu a přítomnost hub a Trichomonas. Pokud nejsou žádné houby nebo Trichomonas, ale počet leukocytů se zvyšuje, lékař předepíše místní antibakteriální léčivo se širokým spektrem účinku. To znamená, že je zaručeno, že porazí všechny mikroorganismy. A nezáleží na tom, které mikroorganismy způsobily zánět. Lék je všechny „zabije“.

Ale někdy tento nátěr sám o sobě nestačí. Je nutné zjistit přesnou sadu patogenních bakterií a mikroorganismů, jejich počet a také určit, které antibakteriální léčivo je nejlepší k léčbě. Poté je nádrž zaseta z cervikálního kanálu kvůli flóře a citlivosti na antibiotika (ab).

Výsev je obvykle předepsán, pokud místní antibakteriální léčivo nezmiňuje zánět, zejména u těhotných žen.

Proč je to převzato z nastávajících matek?

Některé mikroorganismy (například Candida albicans) vyvolávají u budoucích matek infekci membrán a v důsledku toho infekci plodu a (nebo) předčasné prasknutí plodové vody vypouštěním vody. A při porodu nebo během císařského řezu mohou tyto mikroorganismy vyvolat vývoj endometritidy a někdy dokonce sepse - otravy krve.

A co když je výsev špatný u ženy, která není těhotná? Infekce v těle je vždy špatná. Pokud existují příznaky zánětu (patologický výtok, svědění, hyperemie - zarudnutí stydkých pysků), musíte být léčeni. Pokud se tak nestane, může se infekce rozšířit do močového měchýře (dojde k cystitidě) nebo dokonce do ledvin - pak bude existovat pyelonefritida, velmi závažné onemocnění.

Jak se připravit na dodávku bakteriální kultury a kolik dní se provádí

Musíte pochopit, že přesnost výsledku analýzy do značné míry závisí na ženě. Dva dny před porodem, pohlavní styk, ultrazvuk pomocí vaginálního senzoru (protože je na něj nanesen gel, který pak zůstává na krku), sprchování, použití lubrikantů atd. Kromě toho nemusí být výsledek přesný, pokud žena právě ukončila užívání lokálních antibakteriálních léků (čípky nebo pilulky) nebo dokončila perorální (ústní) podávání antibiotik před méně než měsícem.

A další důležitý bod - 2 nátěry nelze odebrat ve stejný den, například bakteriální kultura a PCR, jinak nemusí být výsledek spolehlivý.

Alkohol užívaný několik hodin před aplikací nátěru však neovlivní jeho přesnost.
Doba trvání analýzy je 5–7 dní, tolik je zapotřebí k tomu, aby různé mikroorganismy rostly v živném médiu, a jsou nalezeny laboratorními asistenty.

Jak darovat bakteriální kulturu z cervikálního kanálu

Mnoho žen se zajímá o to, co si musíte vzít s sebou ke gynekologovi, jak vzít kulturu a zda to bolí. Ve skutečnosti je to jako obyčejný „šmejd“. Vezme se na židli. Nejprve lékař vloží zrcátko do pochvy a otevře děložní čípek. Poté vatovým tamponem odstraní z vnějšího hltanu (vestibulu cervikálního kanálu) tzv. Slizniční zátku. A pak tam vloží speciální tenký kartáč na délku až 1,5 cm. Otočí ji tam a vytáhne ji.

Trochu nepříjemný proces, ale docela snesitelný. Úleva od bolesti není nutná. K lékaři nemusíte brát nic zvláštního. Možná si vezměte kalhotkovou vložku, protože po rozmazání může trochu rozmazat.

Co detekuje bakteriální kulturu

Bakteriální kultura odhaluje patogenní a oportunní mikroflóru. Špatný výsev se zvažuje, pokud se zjistí hojný růst nějakého mikroorganismu. To je obvykle vyjádřeno v číslech 10 až 5 nebo vyšší. Pokud nedošlo k růstu bakterií, pak v závěru píší tak - "nedochází k růstu patogenní a podmíněně patogenní mikroflóry." To je norma. Obvykle je také uvedeno, v jakém množství jsou bifido a laktobacily. Pokud je 10 až 2 stupně nebo méně, není ve vagině dostatek užitečné mikroflóry, což je důvod, proč růst patogenních.

Zde jsou některé bakterie, které lze detekovat:

  • enterococcus faecalis - fekální enterokok;
  • e.coli - Escherichia coli;
  • candida (albicans) - candida albicans, viník drozdů;
  • klebsiella pneumonia - Klebsiella pneumonia nebo Friedlanderův bacil;
  • pseudomonas aeruginosa - Pseudomonas aeruginosa;
  • stafylokoky (epidermidis, haemolyticus, chromogenes) - epidermální stafylokoky, hemolytické;
  • leptotrichia amnionii (leptotrichia amnioni, leptotrix);
  • proteus vulgaris - proteus vulgaris;
  • gardnerella vaginalis - vaginální gardnerella, způsobuje gardnerella nebo bakteriální vaginózu.

Pokud jde o některé bakterie, které způsobují takzvané latentní genitální infekce, například ureaplasma, mycoplasma, obvykle darují oddělené plodiny. Stává se, že v nátěru PCR je vše čisté a v kultuře se nachází 10 ^ 4 ureaplasmy. S tím by se zacházelo v zahraničí, ale v Rusku se s nimi často zachází. Ale pak nechte gynekologa rozhodnout sami. Pokud je nátěr na flóru dobrý a secí nádrž špatná, pak se také podívají na příznaky, stížnosti ženy a na to, zda plánuje těhotenství v blízké budoucnosti.

Příklad bakteriálního setí a dekódování jeho výsledku

U ženy byly diagnostikovány houby rodu Candida (hojný růst - 10 ^ 7) a snížený počet laktobacilů. Písmeno R opačné protiplísňové látky označuje rezistenci (rezistenci) těchto hub vůči těmto lékům. A písmeno S je pro citlivost. To znamená, že ženě bude předepsána léčba flukonazolem, nystatinem nebo amfotericinem B a poté se pravděpodobně doporučí vaginální léky k naplnění pochvy prospěšnou mikroflórou.